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ren谷丙转氨酶(ALT)试剂盒价格

如果ninduigai荣一登录感兴qu的话,可yi
荣一登录名称: ren谷丙转氨酶(ALT)试剂盒价格
荣一登录型号: ALT
荣一登录zhan商: ELISA试剂盒
荣一登录文档: wuxiang关文档

简单介绍

ren谷丙转氨酶(ALT)试剂盒价格caiyong双荣一登录夹心ELISA法。yong抗renALT荣一登录bao被于酶标板上,实验时样品或标譲i分械膔enALT与bao被荣一登录结合,游离的成分被洗去。依ci加rusheng物素化的抗renALT荣一登录和辣根过yang化物酶标记的亲和素。抗renALT荣一登录与结簒ian赽ao被荣一登录蓌i膔enALT结合、sheng物素与亲和素特异性结合而xing成**fu合物,游离的成分被洗去。加ruxian色底物(TMB),TMB在辣根过yang化物酶的催化下呈xian蓝色,加终zhiye后变成黄色。yong酶标仪在450nm波长处测ODzhi,ren谷丙转氨酶(ALT)试剂盒浓度与OD450zhi之jian呈正比,通过hui制标准qu线ji算chu样品中renALT的浓度。


ren谷丙转氨酶(ALT)试剂盒价格  的详细介绍


ren谷丙转氨酶(ALT)试剂盒价格

使yong说mingshu

ren谷丙转氨酶(ALT)试剂盒基ben原理:

caiyong双荣一登录夹心ELISA法。yong抗renALT荣一登录bao被于酶标板上,实验时样品或标譲i分械膔enALT与bao被荣一登录结合,游离的成分被洗去。依ci加rusheng物素化的抗renALT荣一登录和辣根过yang化物酶标记的亲和素。抗renALT荣一登录与结簒ian赽ao被荣一登录蓌i膔enALT结合、sheng物素与亲和素特异性结合而xing成**fu合物,游离的成分被洗去。加ruxian色底物(TMB),TMB在辣根过yang化物酶的催化下呈xian蓝色,加终zhiye后变成黄色。yong酶标仪在450nm波长处测ODzhi,renALT浓度与OD450zhi之jian呈正比,通过hui制标准qu线ji算chu样品中renALT的浓度。

ren谷丙转氨酶(ALT)试剂盒描述:

英文名称 Human ALT (Alanine Transaminase) ELISA Kit
謝ing拿劈/span> ren谷丙转氨酶(ALT)酶联**吸附测定试剂盒
货号 X-EL-H0312c 种属 Human/ren
规格 96T/Kit (8*12 strips) 48T/Kit (8*6 strips)
检测方法 双荣一登录夹心法
检测范围 0.313~20ng/mL 灵敏度 0.188ng/mL

ren谷丙转氨酶(ALT)试剂盒价格组成:

謝ing拿劈/span>

英文名称

规格

保存

  ELISA酶标板(可拆卸)

  Micro ELISA  Plate(Dismountable)

  8×12 / 8×6*

4/-20 #

冻干标譲i饵/span>

Reference Standard

  2/1 zhi*

4/-20 #

标譲i饵/span>&样品稀释ye

Reference Standard & Sample Diluent

  1 20mL/12mL*

4

浓缩sheng物素化荣一登录

Concentrated Biotinylated Detection Ab

  1zhi 120μL/70μL*

4/-20 #

sheng物素化荣一登录稀释ye

Biotinytated Detection Ab Diluent

  1 10mL/6mL*

4

浓缩HRP酶结合物

Concentrated HRP Conjugate

  1zhi 120μL/70μL*

4(bi光)

酶结合物稀释ye

HRP Conjugate Diluent

  1 10mL/6mL*

4

浓缩洗涤ye(25×

ConcentratedWashBuffer (25×)

  1 30mL/16mL*

4

底物溶ye(TMB

Substrate Reagent

  1 10mL/6mL*

4(bi光)

反ying终zhiye

Stop Solution

  1 10mL/6mL*

4

封板竎ai|/span>

Plate Sealer

  5/3 *

 

荣一登录说mingshu

Product  Description

  1 

 

质检报告

Certificate of Analysis

  1 

 

特别说ming
*: [96T/48T](打开bao装后qing及时检cha所觴ing锲肥欠衿肴暾?/span>
#: 一周内使yong可存于4℃,需长时jian存放或多ci使yongjian议存于-20.                                      

ren谷丙转氨酶(ALT)试剂盒检测前准备工作:

1. qing提前20分钟从冰箱中取chu试剂盒,平衡至shi温。

2. jiang浓缩洗涤yeyong双蒸水稀释(1:25)。未yong完的放回4℃。从冰箱中取chu的浓缩洗涤ye可neng有结晶,属于正常xian象,可yong40℃水浴微加热使结晶完全溶解后再配制洗涤ye(加热温度瞙ui?/span>50℃,使yong时洗涤yeying为shi温)。当日使yong。

3. 标譲i饵/span>10000×g离心1分钟,加ru标譲i饵/span>&样品稀释ye1.0mL至冻干标譲i分校鬵uan盖,静置10分钟,上下dian倒shuci,待qi充分溶解后,yong移yeqijiangqi轻轻混yun(浓度为8000pg/mL)。然后根据需要进行倍眗en∈停ㄗⅲ翰hui苯釉诜磞ingkong中进行倍眗en∈停ian议配制成yi下浓度:按照稀释方法图例 标譲i饵/span>&样品稀释ye直接作为kong白kong0ng/mL。如配制5ng/mL标譲i罚喝狘/span>0.5mL10ng/mL的上述标譲i芳觬u含有0.5mL标譲i饵/span>&样品稀释ye的EPguan中,混yun即可,qi余浓度依此类推。 

4. sheng物素化荣一登录工作ye:实验前ji算当ci实验所需yong量(yi100μL/kongji),实ji配制时ying多配制100-200μL。使yong前15分钟,yisheng物素化荣一登录稀释ye稀释浓缩sheng物素化荣一登录(1:100)成工作浓度。当日使yong。

5. 酶结合物工作ye:实验前ji算当ci实验所需yong量(yi100μL/kongji),实ji配制时ying多配制100-200μL。使yong前15分钟,yi酶结合物稀释ye稀释浓缩HRP酶结合物(1:100)成工作浓度。

当日使yong。

ren谷丙转氨酶(ALT)试剂盒标譲i废∈头椒ㄍ祭海▂i500μL/guan为例,也可根据实jiyong量来稀释,如200μL/guan)

            

1. 在各kong中加ru标譲i坊蜓犯鳇/span>100μL 37℃孵育90分钟

2. 加ru100μsheng物素化荣一登录工作ye,37℃孵育60分钟

3. 洗涤3ci

4. 加ru100μL酶结合物工作ye, 37℃孵育30分钟

5. 洗涤5ci

6. 加ru90μL底物溶ye, 37℃孵育15分钟左右

7. 加ru50μL终zhiye,li即在450nm波长处测量ODzhi

8. 结果ji算

一、操作yin素duiELISA结果的影响ELISA操作步zhoufu杂,操作bu当jiang引起较大的误cha。yi下叙述各个步zhou中的影响yin素。

1.加样

2.温育

3.洗涤

4.xian色

5.比色

er、huiqu的she置通常情况下,ELISA定性实验yi“阳性”和“阴性”来报告结果,两者jian有一条分jie线被称为“阳性判秞ian怠保?/span>cut-off valueCOzhi),这是定性**测定结果报告的依据。

三、标benfuchaELISAshou工检测过程fu杂,影响yin素较多,即使shi内质控在控,也可nengyinkongjiancha异而造成结果的cha异,yin此加大fucha力度是保证结果准确性的可靠方法,比如duiHBsAgHBeAgHCV-AbHIV-AbTP-Ab祌en钅康目梢伞uo阳性标ben及少见模shi的检测结果进行fucha。

四、结果判断和报告常yong下lie几种方法表示结果:

1.定性测定

2.ban定量测定 结果一般yidi度表示。

3.定量测定 即yong已知量的标譲i纷饕粁ilie稀释后进行ELISA测定,hui制标准qu线,结果yiyou良量或单wei表示。在ELISA定量检测中每一块反ying板都必xuhui制xiangying的标准qu线。

注意事xiang:

仔细yue读说mingshu。

检cha试剂盒标签蓌i挠行凇H绻行冢琿ingwu使yong。

按说mingshu确定所有试剂齐全(shu量、体积)。

标ben制备要规范,每份标ben体积要按2-3个fukongyi蓌i牧恐票福ㄖ妫×糠肿皕uo备份。短期内wu法实验者,注意低温保存。

准备好所有实验额外所需物品,(比如移yeqi,试guan,qing洗qi,酶标仪)。

按说mingshujiang所yong试剂平衡至shi温,根据检测标benshu量确定所需试剂的量。

检cha试剂盒内每种试剂的贮存条件,保证所有试剂均按照试剂盒内说mingshu推荐的条件存储。

检chabu稳定或者变质的试剂溶ye(比如沉dian或变色)。有些试剂,比如标譲i废∈蛓e或者检测稀释ye,可neng在sheji蔮en秃谐羋ian物。所有试剂在diru酶标板之前,必需充分混yun。而由于沉dian物的特性,在加ru酶标板之前,必需bu停jiao拌。

保证充穤hi姆跤眏ian和温度。

切wu使yongbutongsheng产批号的试剂取daixian有试剂或混合xian有试剂。

在混合或溶解蛋白溶ye时,bi免泡沫产sheng。

在实验开始之前,安pai好实验流程。

在实验开始之前,qing洁工作台。

若觴ing侍猓瑈ing与我公司或dai理商的糺i鮶hi持联xi

ren谷丙转氨酶(ALT)试剂盒结果判断:

1. 每个标譲i返命/span>ODzhijian去kong白kong的ODzhi后作图,如she置fukong,zeying取qi平均zhiji算。yi标譲i返呐ǘ任猦eng坐标,OD謉i獄ong坐标,huichu标准qu线。亦可yiOD謉i猦eng坐标,标譲i返呐ǘ任獄ong坐标,huichu标准qu线。

2. 推荐使yong专业的qu线制作软件,如curve expert 1.31.4,在软件jie面既可根据样品ODzhi,由标准qu线chachuxiangying的浓度,乘yi稀释倍shuui嗫蒵iang样品的ODzhidairu标准qu线的拟合方程shi,ji算chu样品浓度,再乘yi稀释倍shu,糲i返氖礿i浓度。

3. 若样品ODzhi高于标准qu线上xian,ying适当稀释后zhong测,ji算浓度时ying乘yi稀释倍shu。 

ren谷丙转氨酶(ALT)试剂盒有效期稳定性考察

ben试验yi谷丙转氨酶(ALT)为例

1.  ODzhi:

正常保存条件下有效期内和超过有效期2个月所测ODzhi比较

正常有效期内ODzhi: 3.2512.8452.126, 1.859, 1.463, 1.022, 0.710, 0.08

超过2个月有效期ODzhi:3.1.7, 2.643, 2.125, 1.796, 1.453, 0.876, 0.432, 0.07

2.回收率:分别于定zhi血qing及血浆中加ru一定量的谷丙转氨酶(ALT)标譲i罚瑉hongfu测定并ji算qi品均zhi,回收率为测定zhi与理论zhi的比率。

        正常保存条件下有效期内和过有效期2个月elisa 试剂盒回收率检测结果

Sample

Conditions

Recovery range(%)

Average(%)

Serum(n=6)

normal

88-106

95

After 12 month

80-100

87

EDTA plasma(n=6)

normal

88-106

97

After 12 month

78-98

87

3. 线性:分别于定zhi血qing及血浆中加ru一定量的谷丙转氨酶(ALT)标譲i罚iang标ben按1:2,1:4,1:8稀释,线性范围糲i∈秃笱鵥en中谷丙转氨酶(ALT)含量的测定zhi与理论zhi的比率。

         正常保存条件下有效期内和过有效期2个月elisa 试剂盒回线性检测结果

Sample

Conditions

1:2

1:4

1:8

Serum(n=6)

normal

81-92%

85-90%

89-105%

After 12month

80-88%

82-87%

87-101%

EDTA plasma(n=6)

normal

93-104%

81-97%

91-96%

After 12month

82-95%

75-82%

74-90%

4.  jing密度:yi样苀an舛▃hi的变异xishuCV表示。CV%=SD/meanx100

批内cha:取tong一批ci试剂盒dui低zhi,中zhi簍ou遺hi样ben进行定量检测,每份样ben测定20ci,分别ji算butong浓度样ben的平均zhi和SDzhi。

批jiancha:选取 3 个butong批ci的试剂盒分别dui低、中、高zhi定zhi样ben进行定量测定, 每个样ben使yongtong一试剂盒zhongfu测定 8 ci,分别ji算butong浓度样ben的平均zhi及 SD zhi。(批内cha: CV<10%;批jiancha: CV<11%)

       正常保存条件下有效期内和过有效期2个月elisa 试剂盒回jing密度检测结果

                    Intra-assay precision

Conditions

normal

After 12month

normal

After 12month

normal

After 12month

sample

1

1

2

2

3

3

n

20

20

20

20

20

20

Mean(ng/ml)

16.68

14.22

70.25

62.36

369.75

327.88

SD

1.08

1.25

4.21

5.31

24.69

32.87

CV(%)

6.5

8.8

6.0

8.5

6.6

10

  

Conditions

normal

After 12month

normal

After 12month

normal

After 12month

Sample

1

1

2

2

3

3

n

20

20

20

20

20

20

Mean(ng/ml)

18.72

13.68

65.98

61.25

387.22

425.26

SD

1.45

1.52

4.83

5.18

28.49

36.87

CV%

7.7

11.1

7.3

8.5

7.3

8.7

ren谷丙转氨酶(ALT)试剂盒会chuxian的问题及解决办法:

1. 加ru反ying终zhiye后,没觴ing鈠hi或吸光zhi偏低。

a.原yin:未加ru酶标记物。

解决办法:qing按照操作步zhou进行。

b.原yin:试剂盒内容物未neng充分回。

解决办法:确定试剂盒内容物回温后再进行操作。

c.原yin:shi温太低。

解决办法:若shi温太低(<19),qing于操作步zhou4,适当延长温育时jian。

d.原yin:未使yong试剂盒的qing洗yeqing洗。

解决办法: qingyong试剂盒内所提gong的qing洗yeqing洗。

e.原yin:试剂盒已过有效期xian。

解决办法:qing更huan成仍在有效期xian内的试剂盒。

2. 标准qu线线性bu佳,或是平行性bu好。

a.原yin:温育wei置bi光bu好或受到气流干扰。

解决办法: qing确ren温育wei置既butou光也butou风(如抽屉内)

b.原yin:操作时jian拖太久。

解决办法:qing在方法熟练后再进行操作。

c.原yin:微kongjianxianghu污染。

解决办法: 加样品时,qing小心wu溅chu微kong外,yi免造成qi它微kong的污染。

d.原yin:标譲i坊蛎副昙俏锼觬u的量瞙ui恢隆Ⅻ/span>

解决办法:qing使yong已校正过的移yeqiang,并确保qi与吸头之jian有高度密合性。

e.原yin:tian加样品或试剂的操作方法bu正确。

解决办法:加样品或试剂时,吸头qingwu接触微kong。

f.原yin:洗板过程发sheng问题(如guan路堵sai、洗完板后未like进行下一步zhou)

解决办法:qing随时jian控洗板ji洗板过程,洗完后li即进行下一步zhou。

3. 吸光zhi均偏高(或线性bu够陡)

a.原yin:shi温太高(>25)

解决办法: 若wu法降低shi内温度,qing适当缩短步zhou4的温育时jian。

b.原yin:底物溶ye受到污染。

解决办法: 若发xian底物溶ye已呈xian淡蓝色,qing瞙ui偈箉ong。

c.原yin:反ying时jian超过太久。

解决办法:qing控制反ying时jian。

d.原yin:酶标记物污染了盒内qi它试剂。

解决办法:使yong过的吸头yingli即丢弃,可bi免试剂jianxianghu污染,fan是试剂(特别是酶标记物与底物溶ye)接触过的容qiyingli即qing洗干净。(先yi漂白水浸泡,再yiqing水冲洗干净,可确保wu残liu)

4. 阴性标譲i返奈鈠hi低于阳性标譲i返奈鈠hi。

a.原yin:微kong中的试剂未neng充分混合。

解决办法: 试剂加完后,需轻敲pan四周使qi充分混合均yun。

b.原yin:洗板过程发sheng问题(tong2-f.)

解决办法:qing参考2-f.

c.原yin:tian加样品或酶标记物的量瞙ui恢隆Ⅻ/span>

解决办法: qing参考2-d.

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