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ATCC细bao 人cheng蟬ong竍ao生长yinzi7(FGF7)试ji盒

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荣一登录名称: ATCC细bao 人cheng蟬ong竍ao生长yinzi7(FGF7)试ji盒
荣一登录型号: FGF7
荣一登录展商: ELISA试ji盒
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简单介绍

ATCC细bao 人cheng蟬ong竍ao生长yinzi7(FGF7)试ji盒cai用双荣一登录夹心ELISA法。觤ei谷薋GF7荣一登录包被yu酶标板上,实验shi样品或标zhun品中的人FGF7与包被荣一登录jie合,you离的cheng分被洗去。襩ai渭尤肷锼鼗目谷薋GF7荣一登录he辣根过氧化物酶标记的qinhe素。抗人FGF7荣一登录与jie合在包被荣一登录上的人FGF7jie合、生物素与qinhe素特异性jie合而xingcheng**复合物,you离的cheng分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的cui化下呈现lan色,加终止液后biancheng黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,人cheng蟬ong竍ao生长yinzi7(FGF7)试ji簒inǘ扔隣D450值zhi间呈正比,通过绘制标zhun曲线计算chu样品中人FGF7的浓度。


ATCC细bao 人cheng蟬ong竍ao生长yinzi7(FGF7)试ji盒  的xiang细介绍


ATCC细bao 人cheng蟬ong竍ao生长yinzi7(FGF7)试ji盒

使用说明书

cheng蟬ong竍ao生长yinzi7(FGF7)试ji盒基本原li:

cai用双荣一登录夹心ELISA法。觤ei谷薋GF7荣一登录包被yu酶标板上,实验shi样品或标zhun品中的人FGF7与包被荣一登录jie合,you离的cheng分被洗去。襩ai渭尤肷锼鼗目谷薋GF7荣一登录he辣根过氧化物酶标记的qinhe素。抗人FGF7荣一登录与jie合在包被荣一登录上的人FGF7jie合、生物素与qinhe素特异性jie合而xingcheng**复合物,you离的cheng分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的cui化下呈现lan色,加终止液后biancheng黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,人FGF7浓度与OD450值zhi间呈正比,通过绘制标zhun曲线计算chu样品中人FGF7的浓度。

ATCC细bao 人cheng蟬ong竍ao生长yinzi7(FGF7)试ji盒描述:

英文名称 Human FGF7 (Fibroblast Growth Factor 7) ELISA Kit
謝ing拿劈/span> 人cheng蟬ong竍ao生长yinzi7(FGF7)酶lian**吸附测定试ji盒
货号 X-EL-H0092c 种属 Human/人
规格 96T/Kit (8*12 strips) 48T/Kit (8*6 strips)
jian测fang法 双荣一登录夹心法
jian测范wei 31.25~2000pg/mL 灵敏度 18.75pg/mL

ATCC细bao 人cheng蟬ong竍ao生长yinzi7(FGF7)试ji盒组cheng:

謝ing拿劈/span>

英文名称

规格

bao存

  ELISA酶标板(可拆卸)

  Micro ELISA  Plate(Dismountable)

  8×12 / 8×6*

4/-20 #

冻gan标zhun品

Reference Standard

  2/1 *

4/-20 #

标zhun品&样品稀释液

Reference Standard & Sample Diluent

  1 20mL/12mL*

4

浓缩生物素化荣一登录

Concentrated Biotinylated Detection Ab

  1 120μL/70μL*

4/-20 #

生物素化荣一登录稀释液

Biotinytated Detection Ab Diluent

  1 10mL/6mL*

4

浓缩HRP酶jie合物

Concentrated HRP Conjugate

  1 120μL/70μL*

4(避光)

酶jie合物稀释液

HRP Conjugate Diluent

  1 10mL/6mL*

4

浓缩洗祔ou海?/span>25×

ConcentratedWashBuffer (25×)

  1 30mL/16mL*

4

底物溶液(TMB

Substrate Reagent

  1 10mL/6mL*

4(避光)

反应终止液

Stop Solution

  1 10mL/6mL*

4

封板覆mo

Plate Sealer

  5/3 zhang*

 

荣一登录说明书

Product  Description

  1 

 

质jian报gao

Certificate of Analysis

  1 

 

特别说明
*: [96T/48T](打开包装后请及shijian查所觴ing锲肥欠衿雚uanwan整)
#: 一周内使觤ei纱鎦u4℃,需长shi间存fang或多次使用jian议存yu-20.                                      

cheng蟬ong竍ao生长yinzi7(FGF7)试ji盒jian测前zhun备工作:

1. 请提前20分钟从冰箱中取chu试ji盒,平衡至室温。

2. jiang浓缩洗祔ou河盟珃heng水稀释(1:25)。未用wan的fang回4℃。从冰箱中取chu的浓缩洗祔ou嚎赡苡衘iejing,属yu正常现象,可用40℃水浴微加热使jiejingwanquan溶jie后再pei制洗祔ou海尤任露炔灰?/span>50℃,使用shi洗祔ou河ei室温)。dang日使用。

3. 标zhun品yu10000×g离心1分钟,加入标zhun品&样品稀释液1.0mL至冻gan标zhun品中,xuan紧管盖,jing置10分钟,上下颠倒数次,待其充分溶jie后,用yi液器jiang其轻轻hun匀(浓度wei8000pg/mL)。然后根据需要进行倍眗en∈停▃hu:不要直jie在反应孔中进行倍眗en∈停ian议pei制cheng以下浓度:an照稀释fang法图例 标zhun品&样品稀释液直jie作wei空bai孔0ng/mL。如pei制5ng/mL标zhun品:取0.5mL10ng/mL的上述标zhun品加入含有0.5mL标zhun品&样品稀释液的EP管中,hun匀即可,其余浓度襩ai死嗤啤Ⅻ/span> 

4. 生物素化荣一登录工作液:实验前计算dang次实验所需用量(以100μL/縵hun疲导蕄ei制shi应多pei制100-200μL。使用前15分钟,以生物素化荣一登录稀释液稀释浓缩生物素化荣一登录(1:100)cheng工作浓度。dang日使用。

5. 酶jie合物工作液:实验前计算dang次实验所需用量(以100μL/縵hun疲导蕄ei制shi应多pei制100-200μL。使用前15分钟,以酶jie合物稀释液稀释浓缩HRP酶jie合物(1:100)cheng工作浓度。

dang日使用。

cheng蟬ong竍ao生长yinzi7(FGF7)试ji盒标zhun品稀释fang法图例:(以500μL/管wei例,也可根据实际用量lai稀释,如200μL/管)

            

1. 在各孔中加入标zhun品或样品各100μL 37℃孵育90分钟

2. 加入100μ生物素化荣一登录工作液,37℃孵育60分钟

3. 洗涤3

4. 加入100μL酶jie合物工作液, 37℃孵育30分钟

5. 洗涤5

6. 加入90μL底物溶液, 37℃孵育15分钟zuoyou

7. 加入50μL终止液,立即在450nm波长处测量OD

8. jie果计算

一、cao作yin素对ELISAjie果的影响ELISAcao作步zhou复杂,cao作不dangjiangyin起较大的误cha。以下xu述各个步zhou中的影响yin素。

1.加样

2.温育

3.洗涤

4.显色

5.比色

二、灰区的设置通常情况下,ELISA定性实验以“阳性”he“yin性”lai报gaojie果,两zhe间有一tiao分界线被称wei“阳性判断值ao?/span>cut-off valueCO值),zhe是定性**测定jie果报gao的依据。

san、标本复查ELISA手工jian测过程复杂,影响yin素较多,即使室内质控在控,也可能yin縵hun鋍ha异而造chengjie果的cha异,yin此加大复查力度是bao证jie果zhunque性的可靠fang法,比如对HBsAgHBeAgHCV-AbHIV-AbTP-Ab祌en钅康目梢伞⑷跹粜yuan瓯炯吧賘ian模式的jian测jie果进行复查。

四、jie果判断he报gao常用下列几种fang法表shijie果:

1.定性测定

2.半定量测定 jie果一般以di度表shi。

3.定量测定 即用yi知量的标zhun品作一系列稀释后进行ELISA测定,绘制标zhun曲线,jie果以优羓i炕虻ノ槐韘hi。在ELISA定量jian测中mei一块反应板都bi须绘制相应的标zhun曲线。

zhu意事xiang:

仔细阅du说明书。

jian查试ji盒标签上的有xiaoqi。如果超过有xiaoqi,请wu使用。

an说明书que定所有试ji齐quan(数量、体积)。

标本制备要规范,mei份标本体积要an2-3个复孔以上的量制备(贮存),尽量分譩ai霰阜荨6蘱i内无法实验zhe,zhu意低温bao存。

zhun备好所有实验ewai所需物品,(比如yi液器,试管,清洗器,酶标仪)。

an说明书jiang所用试ji平衡至室温,根据jian测标本数量que定所需试ji的量。

jian查试ji盒内mei种试ji的贮存tiao件,bao证所有试ji均an照试ji盒内说明书推荐的tiao件存chu。

jian查不稳定或zhebian质的试ji溶液(比如沉淀或bian色)。有些试ji,比如标zhun品稀释液或zhejian测稀释液,可能在设计shi就含有沉淀物。所有试ji在di入酶标板zhi前,bi需充分hun匀。而由yu沉淀物的特性,在加入酶标板zhi前,bi需不停jiaoban。

bao证充分的孵育shi间he温度。

莤ing鹗褂貌煌诺氖詊i取代现有试ji或hun合现有试ji。

在hun合或溶jiedanbai溶液蔮ao苊馀菽Ⅻ/span>

在实验开始zhi前,安排好实验流程。

在实验开始zhi前,清洁工作台。

若觴ing蕋i,应与我公薺ing虼鷏i商的技术支持lian系

cheng蟬ong竍ao生长yinzi7(FGF7)试ji盒jie果判断:

1. mei个标zhun品的OD值减去空bai孔的OD值后作图,如设置复孔,则应取其平均值计算。襶uan陑hun品的浓度wei横坐标,OD值weizong坐标,绘chu标zhun曲线。亦可以OD值wei横坐标,标zhun品的浓度weizong坐标,绘chu标zhun曲线。

2. 推荐使用专业的曲线制作软件,如curve expert 1.31.4,在软件界面既可根据样品OD值,由标zhun曲线查chu相应的浓度,cheng以稀释倍数;亦可jiang样品的OD值代入标zhun曲线的拟合fang程式,计算chu样苀angǘ龋賑heng以稀释倍数,即wei样品的实际浓度。

3. 若样品OD值gaoyu标zhun曲线上限,应shidang稀释后重测,计算浓度shi应cheng以稀释倍数。 

cheng蟬ong竍ao生长yinzi7(FGF7)试ji盒有xiaoqi稳定性考cha

本试验以cheng蟬ong竍ao生长yinzi7(FGF7)wei例

1.  OD值:

正常bao存tiao件下有xiaoqi内he超过有xiaoqi2个月所测OD謉ang冉吸/span>

正常有xiaoqi内OD值: 3.2512.8452.126, 1.859, 1.463, 1.022, 0.710, 0.08

超过2个月有xiaoqiOD值:3.1.7, 2.643, 2.125, 1.796, 1.453, 0.876, 0.432, 0.07

2.回收lv:分别yu定值血清及血jiang中加入一定量的cheng蟬ong竍ao生长yinzi7(FGF7)标zhun品,重复测定并计算其品均值,回收lvwei测定值与lilun值的比lv。

        正常bao存tiao件下有xiaoqi内he过有xiaoqi2个月elisa 试ji盒回收lvjian测jie果

Sample

Conditions

Recovery range(%)

Average(%)

Serum(n=6)

normal

88-106

95

After 12 month

80-100

87

EDTA plasma(n=6)

normal

88-106

97

After 12 month

78-98

87

3. 线性:分别yu定值血清及血jiang中加入一定量的cheng蟬ong竍ao生长yinzi7(FGF7)标zhun品,并jiang标本an1:2,1:4,1:8稀释,线性范wei即wei稀释后样本中cheng蟬ong竍ao生长yinzi7(FGF7)含量的测定值与lilun值的比lv。

         正常bao存tiao件下有xiaoqi内he过有xiaoqi2个月elisa 试ji盒回线性jian测jie果

Sample

Conditions

1:2

1:4

1:8

Serum(n=6)

normal

81-92%

85-90%

89-105%

After 12month

80-88%

82-87%

87-101%

EDTA plasma(n=6)

normal

93-104%

81-97%

91-96%

After 12month

82-95%

75-82%

74-90%

4.  精密度:以样品测定值的bian异系数CV表shi。CV%=SD/meanx100

批内cha:取同一批次试ji盒对低值,中值hegao值样本进行定量jian测,mei份样眏ing舛?span>20次,分别计算不同浓度样本的平均值heSD值。

批间cha:选取 3 个不同批次的试ji盒分别对低、中、gao值定值样本进行定量测定, mei个样本使用同一试ji盒重复测定 8 次,分别计算不同浓度样本的平均值及 SD 值。(批内cha: CV<10%;批间cha: CV<11%)

       正常bao存tiao件下有xiaoqi内he过有xiaoqi2个月elisa 试ji盒回精密度jian测jie果

                    Intra-assay precision

Conditions

normal

After 12month

normal

After 12month

normal

After 12month

sample

1

1

2

2

3

3

n

20

20

20

20

20

20

Mean(ng/ml)

16.68

14.22

70.25

62.36

369.75

327.88

SD

1.08

1.25

4.21

5.31

24.69

32.87

CV(%)

6.5

8.8

6.0

8.5

6.6

10

  

Conditions

normal

After 12month

normal

After 12month

normal

After 12month

Sample

1

1

2

2

3

3

n

20

20

20

20

20

20

Mean(ng/ml)

18.72

13.68

65.98

61.25

387.22

425.26

SD

1.45

1.52

4.83

5.18

28.49

36.87

CV%

7.7

11.1

7.3

8.5

7.3

8.7

cheng蟬ong竍ao生长yinzi7(FGF7)试ji盒会chu现的问ti及jie决办法:

1. 加入反应终止液后,没觴ing庵祷蛭庵灯汀Ⅻ/span>

a.原yin:未加入酶标记物。

jie决办法:请an照cao作步zhou进行。

b.原yin:试ji盒内rong物未能充分回。

jie决办法:que定试ji盒内rong物回温后再进行cao作。

c.原yin:室温太低。

jie决办法:若室温太低(<19),请yucao作步zhou4,shidangyan长温育shi间。

d.原yin:未使用试ji盒的清洗液清洗。

jie决办法: 请用试ji盒内所提供的清洗液清洗。

e.原yin:试ji盒yi过有xiaoqi限。

jie决办法:请genghuancheng仍在有xiaoqi限内的试ji盒。

2. 标zhun曲线线性不佳,或是平行性不好。

a.原yin:温育位置避光不好或shou到qi流gan扰。

jie决办法: 请queren温育位置既不透光也不透风(如chou屉内)

b.原yin:cao作shi间拖太久。

jie决办法:请在fang法熟练后再进行cao作。

c.原yin:微縵hun湎嗷ノ廴尽Ⅻ/span>

jie决办法: 加样品蔮ao胄⌒膚u溅chu微孔wai,以免造cheng其它微孔的污染。

d.原yin:标zhun品或酶标记物所加入的量不一致。

jie决办法:请使用yi校正过的yi液枪,并quebao其与吸头zhi间有gao度密合性。

e.原yin:添加样品或试ji的cao作fang法不正que。

jie决办法:加样品或试ji蔮ao非雡ujie触微孔。

f.原yin:洗板过程发生问ti(如管路堵塞、洗wan板后未立刻进行下一步zhou)

jie决办法:请随shi监控洗板机洗板过程,洗wan后立即进行下一步zhou。

3. 吸光值均偏gao(或线性不够陡)

a.原yin:室温太gao(>25)

jie决办法: 若无法降低室内温度,请shidang缩短步zhou4的温育shi间。

b.原yin:底物溶液shou到污染。

jie决办法: 若发现底物溶液yi呈现danlan色,请不要再使用。

c.原yin:反应shi间超过太久。

jie决办法:请控制反应shi间。

d.原yin:酶标记物污染了盒内其它试ji。

jie决办法:使用过的吸头应立即丢弃,可避免试ji间相互污染,凡是试ji(特别蕅iao副昙俏镉氲孜锶芤裹/span>)jie触过的rong器应立即清洗ganjing。(先以漂bai水浸泡,再以清水chong洗ganjing,可quebao无残liu)

4. yin衴uan陑hun品的吸光值低yu阳衴uan陑hun品的吸光值。

a.原yin:微孔中的试ji未能充分hun合。

jie决办法: 试ji加wan后,需轻qiao盘四周使其充分hun合均匀。

b.原yin:洗板过程发生问ti(2-f.)

jie决办法:请参考2-f.

c.原yin:添加样品或酶标记物的量不一致。

jie决办法: 请参考2-d.

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zhu:1.可以使觤ei靔ie键Alt+S或Ctrl+Enter发送xin息!
2.如有bi要,请您liu下您的xiang细lian系fang式!