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人fang基liu酸酯酶B(ARSB)试ji盒

如果您对gai荣一登录感兴趣的话,可以
荣一登录名称: 人fang基liu酸酯酶B(ARSB)试ji盒
荣一登录型hao: ARSB
荣一登录展shang: ELISA试ji盒
荣一登录文dang: 无xiang关文dang

简单介绍

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人fang基liu酸酯酶B(ARSB)试ji盒  的详xi介绍


fang基liu酸酯酶B(ARSB)试ji盒

使用shuo明书

fang基liu酸酯酶B(ARSB)试ji盒基本原理:

本试ji盒采用双荣一登耲i行腅LISA法。用抗人ARSB荣一登录包被于酶标板shang,shi验时样pin或标准pinzhong的人ARSB与包被荣一登录结合,游离的cheng穤hi幌慈ァi次jia入生wu素化的抗人ARSB荣一登录和辣根guo氧化wu酶标记的亲和素。抗人ARSB荣一登耲ia虢岷显诎蝗僖坏锹約hang的人ARSB结合、生wu素与亲和素teyi性结合而形cheng**复合wu,游离的cheng穤hi幌慈ァia入显色底wu(TMB),TMB在辣根guo氧化wu酶的催化下cheng现蓝色,jia终止ye后biancheng黄色。用酶标仪在450nmbo长处测OD值,人ARSBnong度与OD450值zhijiancheng正比,tongguo绘zhi标准曲xian计suanchu样pinzhong人ARSB的nong度。

fang基liu酸酯酶B(ARSB)试ji盒描述:

英文名称 Human ARSB (Arylsulfatase B) ELISA Kit
zhong文名称 人fang基liu酸酯酶B(ARSB)酶联**吸附测定试ji盒
货hao X-EL-H0419c 种属 Human/人
规ge 96T/Kit (8*12 strips) 48T/Kit (8*6 strips)
jian测方法 双荣一登耲i行姆?/span>
jian测范围 0.156~10ng/mL 灵敏度 0.094ng/mL

试ji盒组cheng:

zhong文名称

英文名称

规ge

保存

  ELISA酶标板(可拆卸)

  Micro ELISA  Plate(Dismountable)

  8×12 / 8×6*

4/-20 #

冻干标准pin

Reference Standard

  2/1 zhi*

4/-20 #

标准pin&样pin稀释ye

Reference Standard & Sample Diluent

  1 20mL/12mL*

4

nong缩生wu素化荣一登录

Concentrated Biotinylated Detection Ab

  1zhi 120μL/70μL*

4/-20 #

生wu素化荣一登录稀释ye

Biotinytated Detection Ab Diluent

  1 10mL/6mL*

4

nong缩HRP酶结合wu

Concentrated HRP Conjugate

  1zhi 120μL/70μL*

4(避光)

酶结合wu稀释ye

HRP Conjugate Diluent

  1 10mL/6mL*

4

nong缩洗涤ye(25×

ConcentratedWashBuffer (25×)

  1 30mL/16mL*

4

底wu溶ye(TMB

Substrate Reagent

  1 10mL/6mL*

4(避光)

反应终止ye

Stop Solution

  1 10mL/6mL*

4

封板覆膜

Plate Sealer

  5/3 *

 

荣一登录shuo明书

Product  Description

  1 

 

质jian报告

Certificate of Analysis

  1 

 

te别shuo明
*: [96T/48T](打kai包装后请及时jian查所有wupin是fu齐全完整)
#: 一周na使用可存于4℃,需长时jian存放或多次使用建议存于-20.                                      

fang基liu酸酯酶B(ARSB)试ji盒jian测前准备工作:

1. 请提前20分钟从冰箱zhong取chu试ji盒,平衡至室温。

2. 将nong缩洗涤ye用双蒸水稀释(1:25)。未用完的放回4℃。从冰箱zhong取chu的nong缩洗涤ye可neng有结晶,属于正常现象,可用40℃水yuweijia热使结晶完全溶解后再配zhi洗涤ye(jia热温度不要超guo50℃,使用时洗涤ye应wei室温)。dang日使用。

3. 标准pin10000×g离心1分钟,jia入标准pin&样pin稀释ye1.0mL至冻干标准pinzhong,旋紧管盖,jing置10分钟,shang下颠倒数次,待其chong分溶解后,用yiye器将其轻轻混匀(nong度wei8000pg/mL)。然后根据需要进行倍比稀蕋ingㄗⅲ翰灰獄hi接在反应孔zhong进行倍比稀蕋ing=ㄒ榕鋤hicheng以下nong度:按照稀释方法图例 标准pin&样pin稀释yezhi接作wei空白孔0ng/mL。如配zhi5ng/mL标准pin:取0.5mL10ng/mL的shang述标准苀ang尤牒宵/span>0.5mL标准pin&样pin稀释ye的EP管zhong,混匀即可,其yunong度yi此类推。 

4. 生wu素化荣一登录工作ye:shi验前计suandang次shi验所需用liang(以100μL/孔计),shiji配zhi时应多配zhi100-200μL。使用前15分钟,以生wu素化荣一登录稀释ye稀释nong缩生wu素化荣一登录(1:100)cheng工作nong度。dang日使用。

5. 酶结合wu工作ye:shi验前计suandang次shi验所需用liang(以100μL/孔计),shiji配zhi时应多配zhi100-200μL。使用前15分钟,以酶结合wu稀释ye稀释nong缩HRP酶结合wu(1:100)cheng工作nong度。

dang日使用。

fang基liu酸酯酶B(ARSB)试ji盒标准pin稀释方法图例aiㄒ狱/span>500μL/管wei例,也可根据shiji用liang来稀蕋ing纥/span>200μL/管)

            

1. 在各孔zhongjia入标准pin或样pin各100μL 37℃孵yu90分钟

2. jia入100μ生wu素化荣一登录工作ye,37℃孵yu60分钟

3. 洗涤3

4. jia入100μL酶结合wu工作ye, 37℃孵yu30分钟

5. 洗涤5

6. jia入90μL底wu溶ye, 37℃孵yu15分钟左you

7. jia入50μL终止ye,立即在450nmbo长处测liangOD

8. 结果计suan

一、cao作因素对ELISA结果的影响ELISAcao作步骤复杂,cao作不dang将引qijiao大的误差。以下叙述各个步骤zhong的影响因素。

1.jia样

2.温yu

3.洗涤

4.显色

5.比色

二、灰区的设置tong常情况下,ELISA定性shi验襶u把粜yu焙汀耙跣yu崩幢ǜ娼峁秸遤ian有一tiao分界xian被称wei“阳性判断值”(cut-off valueCO值),这是定性**测定结果报告的yi据。

san、标本复查ELISAshou工jian测guo程复杂,影响因素jiao多,即使室na质控在控,也可neng因孔jian差yi而造cheng结果的差yi,因此jia大复查力度是保证结果准que性的可靠方法,比如对HBsAgHBeAgHCV-AbHIV-AbTP-Ab等xiang目的可yi、弱阳性标本及shao见模式的jian测结果进行复查。

四、结果判断和报告常用下列几种方法表shi结果:

1.定性测定

2.半定liang测定 结果一般以滴度表shi。

3.定liang测定 即用已知liang的标准pin作一系列稀释后进行ELISA测定,绘zhi标准曲xian,结果以优liangliang或单位表shi。在ELISA定liangjian测zhong每一块反应板都必xu绘zhixiang应的标准曲xian。

注yi事xiang:

仔xi阅秎iao得魇椤Ⅻ/span>

jian查试ji盒标签shang的有xiao期。如果超guo有xiao期,请勿使用。

按shuo明书que定所有试ji齐全(数liang、ti积)。

标本zhi备要规范,每份标本ti积要按2-3个复孔以shang的liangzhi备(贮存),尽liang分装做备份。短期na无法shi验者,注yi低温保存。

准备好所有shi验e外所需wupin,(比如yiye器,试管,清洗器,酶标仪)。

按shuo明书将所用试ji平衡至室温,根据jian测标本数liangque定所需试ji的liang。

jian查试ji盒na每种试ji的贮存tiao件,保证所有试ji均按照试ji盒nashuo明书推荐的tiao件存储。

jian查不wen定或者bian謘hi氖詊i溶ye(比如沉淀或bian色)。有些试ji,比如标准pin稀释ye或者jian测稀释ye,可neng在设计时就含有沉淀wu。所有试ji在祑en朊副臧鍅hi前,必需chong分混匀。而由于沉淀wu的te性,在jia入酶标板zhi前,必需不ting搅ban。

保证chong分的孵yu时jian和温度。

qie勿使用不同生chan批hao的试ji取代现有试ji或混合现有试ji。

在混合或溶解蛋白溶ye时,避免泡沫chan生。

在shi验kai始zhi前,an排好shi验流程。

在shi验kai始zhi前,清洁工作台。

若有问题,应与wo公司或代理shang的ji术zhi持联系

fang基liu酸酯酶B(ARSB)试ji盒结果判断:

1. 每个标准pin的OD值减去空白孔的OD值后作图,如设置复孔,则应取其平均值计suan。以标准pin的nong度wei横坐标,OD值wei纵坐标,绘chu标准曲xian。yi可以OD值wei横坐标,标准pin的nong度wei纵坐标,绘chu标准曲xian。

2. 推荐使用专襠ang那鷛ianzhi作软件,如curve expert 1.31.4,在软件界面既可根据样pinOD值,由标准曲xian查chuxiang应的nong度,cheng以稀释倍数;yi可将样pin的OD值代入标准曲xian的拟合方程式,计suanchu样pinnong度,再cheng以稀释倍数,即wei样pin的shijinong度。

3. 若样pinOD值gao于标准曲xianshang限,应蕇hi毕∈秃笾夭猓苨uannong度时应cheng以稀释倍数。 

fang基liu酸酯酶B(ARSB)试ji盒有xiao期wen定性考察

本试验以fang基liu酸酯酶B(ARSB)wei例

1.  OD值:

正常保存tiao件下有xiao期na和超guo有xiao期2个月所测OD謉ang萰iao

正常有xiao期naOD值: 3.2512.8452.126, 1.859, 1.463, 1.022, 0.710, 0.08

超guo2个月有xiao期OD值:3.1.7, 2.643, 2.125, 1.796, 1.453, 0.876, 0.432, 0.07

2.回收lv:穤hi鹩诙ㄖ祒ue清及xue浆zhongjia入襤uan╨iang的fang基liu酸酯酶B(ARSB)标准pin,重复测定并计suan其pin均值,回收lvwei测定值与理论謉ang谋萳v。

        正常保存tiao件下有xiao期na和guo有xiao期2个月elisa 试ji盒回收lvjian测结果

Sample

Conditions

Recovery range(%)

Average(%)

Serum(n=6)

normal

88-106

95

After 12 month

80-100

87

EDTA plasma(n=6)

normal

88-106

97

After 12 month

78-98

87

3. xian性:穤hi鹩诙ㄖ祒ue清及xue浆zhongjia入襤uan╨iang的fang基liu酸酯酶B(ARSB)标准pin,并将标本按1:2,1:4,1:8稀蕋ing瑇ian性范围即wei稀释后样本zhongfang基liu酸酯酶B(ARSB)含liang的测定值与理论謉ang谋萳v。

         正常保存tiao件下有xiao期na和guo有xiao期2个月elisa 试ji盒回xian性jian测结果

Sample

Conditions

1:2

1:4

1:8

Serum(n=6)

normal

81-92%

85-90%

89-105%

After 12month

80-88%

82-87%

87-101%

EDTA plasma(n=6)

normal

93-104%

81-97%

91-96%

After 12month

82-95%

75-82%

74-90%

4.  精mi度:以样pin测定謉ang腷ianyi系数CV表shi。CV%=SD/meanx100

批na差:取同一批次试ji盒对低值,zhong值和gao值样本进行定liangjian测,每份样眏ing舛?span>20次,穤hi鸺苨uan不同nong度样本的平均值和SD值。

批jian差:选取 3 个不同批次的试ji盒穤hi鸲缘汀hong、gao值定值样本进行定liang测定, 每个样本使用同一试ji盒重复测定 8 次,穤hi鸺苨uan不同nong度样本的平均值及 SD 值。(批na差: CV<10%;批jian差: CV<11%)

       正常保存tiao件下有xiao期na和guo有xiao期2个月elisa 试ji盒回精mi度jian测结果

                    Intra-assay precision

Conditions

normal

After 12month

normal

After 12month

normal

After 12month

sample

1

1

2

2

3

3

n

20

20

20

20

20

20

Mean(ng/ml)

16.68

14.22

70.25

62.36

369.75

327.88

SD

1.08

1.25

4.21

5.31

24.69

32.87

CV(%)

6.5

8.8

6.0

8.5

6.6

10

  

Conditions

normal

After 12month

normal

After 12month

normal

After 12month

Sample

1

1

2

2

3

3

n

20

20

20

20

20

20

Mean(ng/ml)

18.72

13.68

65.98

61.25

387.22

425.26

SD

1.45

1.52

4.83

5.18

28.49

36.87

CV%

7.7

11.1

7.3

8.5

7.3

8.7

fang基liu酸酯酶B(ARSB)试ji盒会chu现的问题及解jue办法:

1. jia入反应终止ye后,没有吸光值或吸光值偏低。

a.原因:未jia入酶标记wu。

解jue办法:请按照cao作步骤进行。

b.原因:试ji盒na容wu未nengchong分回。

解jue办法:que定试ji盒na容wu回温后再进行cao作。

c.原因:室温tai低。

解jue办法:若室温tai低(<19),请于cao作步骤4,蕇hi毖映の聐u时jian。

d.原因:未使用试ji盒的清洗ye清洗。

解jue办法: 请用试ji盒na所提供的清洗ye清洗。

e.原因:试ji盒已guo有xiao期限。

解jue办法:请更换chengreng在有xiao期限na的试ji盒。

2. 标准曲xianxian性不佳,或是平行性不好。

a.原因:温yu位置避光不好或受到气流干扰。

解jue办法: 请que认温yu位置既不透光也不透风(如抽tina)

b.原因:cao作时jiantuotai久。

解jue办法:请在方法熟练后再进行cao作。

c.原因:wei孔jianxiang互污染。

解jue办法: jia样pin时,请小心勿jianchuwei孔外,以免造cheng其它wei孔的污染。

d.原因:标准pin或酶标记wu所jia入的liang不一致。

解jue办法:请使用已校正guo的yiyeqiang,并que保其与吸头zhijian有gao度mi合衴uⅫ/span>

e.原因:添jia样pin或试ji的cao作方法不正que。

解jue办法:jia样pin或试ji时,吸头请勿接触wei孔。

f.原因:洗板guo程发生问题(如管路du塞、洗完板后未立刻进行下一步骤)

解jue办法:请随时监控洗板机洗板guo程,洗完后立即进行下一步骤。

3. 吸光值均偏gao(或xian性不gou陡)

a.原因:室温taigao(>25)

解jue办法: 若无法絛ang褪襫a温度,请蕇hi彼醵滩街琰/span>4的温yu时jian。

b.原因:底wu溶ye受到污染。

解jue办法: 若发现底wu溶ye已cheng现dan蓝色,请不要再使用。

c.原因:反应时jian超guotai久。

解jue办法:请控謕in从κ眏ian。

d.原因:酶标记wu污染liao盒na其它试ji。

解jue办法:使用guo的吸头应立即丢弃,可避免试糽iang鋢iang互污染,凡是试ji(te别是酶标记wu与底wu溶ye)接触guo的容器应立即清洗干净。(先以漂白水jin泡,再以清水chong洗干净,可que保无can留)

4. 阴性标准pin的吸光謉ang陀谘粜员曜紁in的吸光值。

a.原因:wei孔zhong的试ji未nengchong分混合。

解jue办法: 试糽iang油旰螅枨崆门趟闹苁蛊鋍hong分混合均匀。

b.原因:洗板guo程发生问题(2-f.)

解jue办法:请参考2-f.

c.原因:添jia样pin或酶标记wu的liang不一致。

解jue办法: 请参考2-d.

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