荣一登录资料

人α1酸性糖danbai(α1-AGP)试剂盒

如果您duigai荣一登录感xing趣的hua,ke以
荣一登录名称: 人α1酸性糖danbai(α1-AGP)试剂盒
荣一登录型号: α1-AGP
荣一登录展商: ELISA试剂盒
荣一登录文dang: 无xiangguan文dang

简单介shao

betway必威手机版


人α1酸性糖danbai(α1-AGP)试剂盒  的xiang细介shao


人α1酸性糖danbai(α1-AGP)试剂盒

使用说明书

人α1酸性糖danbai(α1-AGP)试剂盒基本yuan理:

本试剂盒采用shuang荣一登录夹xinELISA法。用抗人α1-AGP荣一登耲i挥诿副臧迳希瑂hiyan时样品或标譲i分械娜甩?-AGP与包被荣一登录结合,游离的成分被洗去。yi次加入生物素化的抗人α1-AGP荣一登录he辣根过yang化物酶标记的亲he素。抗人α1-AGP荣一登录与结合在包被荣一登录上的人α1-AGP结合、生物素与亲he素特yi性结合而形成**复合物,游离的成分被洗去。加入显se底物(TMB),TMB在辣根过yang化物酶的催化下呈现lanse,加zhongzhi液后bian成huangse。用酶标仪在450nm波长处ceOD值,人α1-AGPnong度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线ji算出样品中人α1-AGP的nong度。

人α1酸性糖danbai(α1-AGP)试剂盒描述:

英文名称 Human α1-AGP (Alpha-1-Acid Glycoprotein) ELISA Kit
中文名称 人α1酸性糖danbai(α1-AGP)酶联**吸附ce定试剂盒
货号 X-EL-H0001c 种属 Human/人
gui格 96T/Kit (8*12 strips) 48T/Kit (8*6 strips)
检ce方法 shuang荣一登录夹xin法
检cefan围 3.125~200ng/mL 灵min度 1.875ng/mL

试剂盒组成:

中文名称

英文名称

gui格

保存

  ELISA酶标板(kechai卸)

  Micro ELISA  Plate(Dismountable)

  8×12 / 8×6*

4/-20 #

冻干标譲i饵/span>

Reference Standard

  2/1 *

4/-20 #

标譲i饵/span>&样品稀shi液

Reference Standard & Sample Diluent

  1 20mL/12mL*

4

nong缩生物素化荣一登录

Concentrated Biotinylated Detection Ab

  1 120μL/70μL*

4/-20 #

生物素化荣一登录稀shi液

Biotinytated Detection Ab Diluent

  1 10mL/6mL*

4

nong缩HRP酶结合物

Concentrated HRP Conjugate

  1 120μL/70μL*

4(避光)

酶结合物稀shi液

HRP Conjugate Diluent

  1 10mL/6mL*

4

nong缩洗涤液(25×

ConcentratedWashBuffer (25×)

  1 30mL/16mL*

4

底物溶液(TMB

Substrate Reagent

  1 10mL/6mL*

4(避光)

反应zhongzhi液

Stop Solution

  1 10mL/6mL*

4

feng板fumo

Plate Sealer

  5/3 *

 

荣一登录说明书

Product  Description

  1 

 

质检报告

Certificate of Analysis

  1 

 

特别说明
*: [96T/48T](da开包装后请ji时检cha所有物品是否齐quanwan整)
#: 
一周内使用ke存于4℃,需长时间存放或多次使用建议存于-20.                                      

人α1酸性糖danbai(α1-AGP)试剂盒检ce莃ai急竒ongzuo:

1. 请ti前20分钟从冰箱中取出试剂盒,平heng至室蝜ongⅫ/span>

2. 将nong缩洗涤液用shuang蒸水稀shi(1:25)。wei用wan的放回4℃。从冰箱中取出的nong缩洗涤液ke能有结晶,属于正chang现xiang,ke用40℃水浴微加热使结晶wanquan溶解后再pei制洗涤液(加热温度不要超过50℃,使用时洗涤液应为室温)。当日使用。

3. 标譲i饵/span>10000×g离xin1分钟,加入标譲i饵/span>&样品稀shi液1.0mL至冻干标譲i分校艄芨牵仓曼/span>10分钟,上下dian倒shu次,待qi充分溶解后,用移液器将qi轻轻混匀(nong度为8000pg/mL)。然后根据需要jin行倍眗enhi(注:不要直接在反应孔中jin行倍眗enhi)。建议pei制成以下nong度:按照稀shi方法图例 标譲i饵/span>&样品稀shi液直接zuo为空bai孔0ng/mL。如pei制5ng/mL标譲i罚喝狘/span>0.5mL10ng/mL的上述标譲i芳尤牒宵/span>0.5mL标譲i饵/span>&样品稀shi液的EP管中,混匀即ke,qi余nong度yici类推。 

4. 生物素化荣一登录gongzuo液:shiyan前ji算当次shiyan所需用量(以100μL/孔ji),shi际pei制时应多pei制100-200μL。使觤en?/span>15分钟,以生物素化荣一登录稀shi液稀shinong缩生物素化荣一登录(1:100)成gongzuonong度。当日使用。

5. 酶结合物gongzuo液:shiyan前ji算当次shiyan所需用量(以100μL/孔ji),shi际pei制时应多pei制100-200μL。使觤en?/span>15分钟,以酶结合物稀shi液稀shinong缩HRP酶结合物(1:100)成gongzuonong度。

当日使用。

人α1酸性糖danbai(α1-AGP)试剂盒标譲i废hi方法图例:(以500μL/管为例,也ke根据shi际用量来稀shi,如200μL/管)

            

1. 在各孔中加入标譲i坊蜓犯鳇/span>100μL 37℃孵育90分钟

2. 加入100μ生物素化荣一登录gongzuo液,37℃孵育60分钟

3. 洗涤3

4. 加入100μL酶结合物gongzuo液, 37℃孵育30分钟

5. 洗涤5

6. 加入90μL底物溶液, 37℃孵育15分钟左右

7. 加入50μLzhongzhi液,立即在450nm波长处ce量OD

8. 结果ji算

一、操zuo因素duiELISA结果的影响ELISA操zuo步骤复杂,操zuo不当将引起较da的误差。以下xu述各个步骤中的影响因素。

1.加样

2.温育

3.洗涤

4.显se

5.比se

er、灰区的设置通chang情况下,ELISA定性shiyan以“阳性”he“阴性”来报告结果,两者间有一条分界线被称为“阳性判断值”(cut-off valueCO值),这是定性**ce定结果报告的yi据。

三、标本复chaELISA蕑hiぜ靋e过cheng复杂,影响因素较多,即使室内质控在控,也ke能因孔间差yi而造成结果的差yi,因ci加da复cha力度是保证结果准确性的ke靠方法,比如duiHBsAgHBeAgHCV-AbHIV-AbTP-Ab祌en钅康膋e疑、ruo阳衴uan瓯緅i少见模蔶iang募靋e结果jin行复cha。

四、结果判断he报告chang用下列几謟hi椒╞iao示结果:

1.定性ce定

2.半定量ce定 结果襤ua阋缘味萣iao蔶inⅫ/span>

3.定量ce定 即用已知量的标譲i穤uo一系列稀shi后jin行ELISAce定,绘制标准曲线,结果以优liang量或单weibiao蔶inT冱/span>ELISA定量检ce中每一块反应板都必须绘制xiang应的标准曲线。

注意事项:

仔细阅秎iao得魇椤Ⅻ/span>

检cha试剂盒标签上的有效期。如果超过有效期,请wu使用。

癱i得魇槿fanㄋ惺约疗雚uan(shu量、体ji)。

标本制备要guifan,每份标本体ji要按2-3个复孔以上的量制备(贮存),jin量分譩ai霰阜荨6唐谀谖薹╯hiyan者,注意低温保存。

准备好所有shiyan额wai所需物品,(比如移液器,试管,qing洗器,酶标仪)。

癱i得魇榻檬约疗絟eng至室温,根据检ce标本shu量萬anㄋ枋约恋牧俊Ⅻ/span>

检cha试剂簒in诿恐质约恋闹嫣跫Vに惺约辆凑帐约梁xin谒得魇橥苆ian的条件存储。

检cha不稳定或者bian謘hi氖约寥芤海ū热绯羋ian或bianse)。有些试剂,比如标譲i废hi液或者检ce稀shi液,ke能在设ji时就含有沉dian物。所有试剂在滴入酶标板之前,必需充分混匀。而you于沉dian物的特性,在加入酶标板之前,必需不停搅拌。

保证充分的孵育时间he温度。

切wu使用不同生产批号的试剂取dai现有试剂或混合现有试剂。

在混合或溶解danbai溶液时,避免泡沫产生。

在shiyan开始之前,an排好shiyan流cheng。

在shiyan开始之前,qingjiegongzuo台。

若有问题,应与我gong司或dai理商的技术支持联系

人α1酸性糖danbai(α1-AGP)试剂盒结果判断:

1. 每个标譲i返命/span>OD值减去空bai孔的OD值后zuo图,如设置复孔,ze应取qi平均值ji算。襶uan曜ji返膎ong度为横zuo标,OD值为纵zuo标,绘出标准曲线。亦ke以OD值为横zuo标,标譲i返膎ong度为纵zuo标,绘出标准曲线。

2. 推jian使用专襠ang那咧苲uo软件,如curve expert 1.31.4,在软件界mian既ke根据样品OD值,you标准曲线cha出xiang应的nong度,cheng以稀shi倍shu;亦ke将样品的OD值dai入标准曲线的拟合方cheng式,ji算出样品nong度,再cheng以稀shi倍shu,即为样品的shi际nong度。

3. 若样品OD值gao于标准曲线上限,应蕇hi毕hi后重ce,ji算nong度时应cheng以稀shi倍shu。 

α1酸性糖danbai(α1-AGP)试剂盒有效期稳定性考察

本试yan以α1酸性糖danbai(α1-AGP)为例

1.        OD值:

正chang保存条件下有效期内he超过有效期2个月所ceOD值比较

正chang有效期内OD值: 3.2512.8452.126, 1.859, 1.463, 1.022, 0.710, 0.08

超过2个月有效期OD值:3.1.7, 2.643, 2.125, 1.796, 1.453, 0.876, 0.432, 0.07

2.回收率:分别于定值血qingji血jiang中加入一定量的α1酸性糖danbai(α1-AGP)标譲i罚馗碿e定bingji算qi品均值,回收率为ce定值与理论謉ang谋嚷省Ⅻ/span>

        正chang保存条件下有效期内he过有效期2个月elisa 试剂盒回收率检ce结果

Sample

Conditions

Recovery range(%)

Average(%)

Serum(n=6)

normal

88-106

95

After 12 month

80-100

87

EDTA plasma(n=6)

normal

88-106

97

After 12 month

78-98

87

 

3.       线性:分别于定值血qingji血jiang中加入一定量的α1酸性糖danbai(α1-AGP)标譲i罚琤ing将标本按1:2,1:4,1:8稀shi,线性fan围即为稀shi后样本中α1酸性糖danbai(α1-AGP)含量的ce定值与理论謉ang谋嚷省Ⅻ/span>

         正chang保存条件下有效期内he过有效期2个月elisa 试剂盒回线性检ce结果

Sample

Conditions

1:2

1:4

1:8

Serum(n=6)

normal

81-92%

85-90%

89-105%

After 12month

80-88%

82-87%

87-101%

EDTA plasma(n=6)

normal

93-104%

81-97%

91-96%

After 12month

82-95%

75-82%

74-90%

 

4.        精密度:以样品ce定謉ang腷ianyi系shuCVbiao蔶inⅫ/span>CV%=SD/meanx100

批内差:取同一批次试剂盒dui低值,中值hegao值样本jin行定量检ce,每份样本ce定20次,分别ji算不同nong度样本的平均值heSD值。

批间差:选取 3 个不同批次的试剂盒分别dui低、中、gao值定值样本jin行定量ce定, 每个样本使用同一试剂盒重复ce定 8 次,分别ji算不同nong度样本的平均值ji SD 值。(批内差: CV<10%;批间差: CV<11%)

       正chang保存条件下有效期内he过有效期2个月elisa 试剂盒回精密度检ce结果

                    Intra-assay precision

Conditions

normal

After 12month

normal

After 12month

normal

After 12month

sample

1

1

2

2

3

3

n

20

20

20

20

20

20

Mean(ng/ml)

16.68

14.22

70.25

62.36

369.75

327.88

SD

1.08

1.25

4.21

5.31

24.69

32.87

CV(%)

6.5

8.8

6.0

8.5

6.6

10

 

Conditions

normal

After 12month

normal

After 12month

normal

After 12month

Sample

1

1

2

2

3

3

n

20

20

20

20

20

20

Mean(ng/ml)

18.72

13.68

65.98

61.25

387.22

425.26

SD

1.45

1.52

4.83

5.18

28.49

36.87

CV%

7.7

11.1

7.3

8.5

7.3

8.7

人α1酸性糖danbai(α1-AGP)试剂盒会出现的问题ji解决办法:

1. 加入反应zhongzhi液后,没有吸光值或吸光值pian低。

a.yuan因:wei加入酶标记物。

解决办法:请按照操zuo步骤jin行。

b.yuan因:试剂簒in谌菸飛ei能充分回。

解决办法:萬anㄊ约梁xin谌菸锘匚潞笤賘in行操zuo。

c.yuan因:室温太低。

解决办法:若室温太低(<19),请于操zuo步骤4,蕇hi毖映の掠奔洹Ⅻ/span>

d.yuan因:wei使用试剂盒的qing洗液qing洗。

解决办法: 请用试剂簒in谒鵷i供的qing洗液qing洗。

e.yuan因:试剂盒已过有效期限。

解决办法:请geng换成reng在有效期限内的试剂盒。

2. 标准曲线线性不佳,或是平行性不好。

a.yuan因:温育wei置避光不好或受到气流干扰。

解决办法: 请确ren温育wei置既不透光也不透风(如抽屉内)

b.yuan因:操zuo时间拖太jiu。

解决办法:请在方法熟lian后再jin行操zuo。

c.yuan因:微孔间xianghu污萰inⅫ/span>

解决办法: 加样品时,请小xinwu溅出微孔wai,以免造成qi它微孔的污萰inⅫ/span>

d.yuan因:标譲i坊蛎副昙俏锼尤氲牧坎灰恢longⅫ/span>

解决办法:请使用已校正过的移液枪,bing确保qi与吸头之间有gao度密合性。

e.yuan因:tian加样品或试剂的操zuo方法不正确。

解决办法:加样品或试剂时,吸头请wu接触微孔。

f.yuan因:洗板过cheng发生问题(如管耭an氯⑾磜an板后wei立刻jin行下一步骤)

解决办法:请随时监控洗板机洗板过cheng,洗wan后立即jin行下一步骤。

3. 吸光值均piangao(或线性不goudou)

a.yuan因:室温太gao(>25)

解决办法: 若无法絛ang褪夷谖露龋胧shi彼醵滩街琰/span>4的温育时间。

b.yuan因:底物溶液受到污萰inⅫ/span>

解决办法: 若发现底物溶液已呈现淡lanse,请不要再使用。

c.yuan因:反应时间超过太jiu。

解决办法:请控制反应时间。

d.yuan因:酶标记物污ranliao簒in趒i它试剂。

解决办法:使用过的吸头应立即丢弃,ke避免试糽iang鋢ianghu污ran,凡是试剂(特别是酶标记物与底物溶液)接触过的容器应立即qing洗干净。(先以piaobai水浸泡,再以qing水冲洗干净,ke确保无残留)

4. 阴衴uan曜ji返奈庵dang陀谘粜yuan曜ji返奈庵怠Ⅻ/span>

a.yuan因:微孔中的试剂wei能充分混合。

解决办法: 试糽iang觲an后,需轻敲pan四周使qi充分混合均匀。

b.yuan因:洗板过cheng发生问题(2-f.)

解决办法:请参考2-f.

c.yuan因:tian加样品或酶标记物的量不一謑ongⅫ/span>

解决办法: 请参考2-d.

 

荣一登录留yan
标题
联系人
联系dianhua
内容
yan证码
点击换一张
注:1.ke以使用快捷键Alt+S或Ctrl+Enter发送信息!
2.如有必要,请您留下您的xiang细联系方式!