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da鼠钙联蛋白(CNX)mei联免疫吸附检测试ji盒

如果您对该荣襤uai锹几行巳さ膆ua,ke以
荣襤uai锹济批 da鼠钙联蛋白(CNX)mei联免疫吸附检测试ji盒
荣襤uai锹夹蚳ao: (CNX
荣襤uai锹颊箂hang: ELISA试ji盒
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简单介绍

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da鼠钙联蛋白(CNX)mei联免疫吸附检测试ji盒  的详细介绍

da鼠钙联蛋白(CNX)mei联**吸附检测试ji盒

使用说ming书

预期应用

ben试ji盒运用双荣襤uai锹技行命span>ELISA法定量测定da鼠血清、血浆、组织匀浆、细bao裂解液、细baopei养shang清液和其他生物液体zhong钙联蛋白(CNX)含量。

da鼠钙联蛋白(CNX)mei联**吸附检测试ji盒基ben原理:

ben试ji盒采用双荣襤uai锹技行腅LISA法。用抗da鼠钙联蛋白(CNX)荣襤uai锹糱aobei于mei标板shang,实验时样品或标譲i穤hong的da鼠钙联蛋白(CNX)与baobei荣襤uai锹糺ie合,you离的成穤hi幌慈ァRlai渭you肷锼豩ua的抗da鼠钙联蛋白(CNX)荣襤uai锹己屠备鮤ua物mei标记的亲和素。抗da鼠钙联蛋白(CNX)荣襤uai锹加雑ie合zaibaobei荣襤uai锹約hang的da鼠钙联蛋白(CNX)jie合、生物素与亲和素te异性jie合er形成**复合物,you离的成穤hi幌慈ァ<you胂陨孜?TMB),TMBzai辣根过氧hua物mei的催hua下呈xian蓝色,加终zhi液后变成黄色。用mei标仪zai450nm波chang处测OD值,da鼠钙联蛋白(CNX)浓度与OD450值zhi间呈正比,通过绘zhi标准quxianjisuan出样品zhongda鼠钙联蛋白(CNX)的浓度。

描述:

ying文名称 Rat CNX (Calnexin) ELISA Kit
zhong文名称 da鼠钙联蛋白(CNX)mei联**吸附测定试ji盒
货hao X-EL-R0141c 种shu Rat/da鼠
guige 96T/Kit (8*12 strips) 48T/Kit (8*6 strips)
检测方法 双荣襤uai锹技行姆?/span>
检测范围 0.156~10ng/mL ling敏度 0.094ng/mL

组成:

zhong文名称

ying文名称

guige

保存

  ELISAmei标板(kechai卸)

  Micro ELISA  Plate(Dismountable)

  8×12 / 8×6*

4/-20 #

冻干标譲i饵/span>

Reference Standard

  2/1 *

4/-20 #

标譲i饵/span>&样品稀释液

Reference Standard & Sample Diluent

  1 20mL/12mL*

4

浓缩生物素hua荣襤uai锹稽/span>

Concentrated Biotinylated Detection Ab

  1 120μL/70μL*

4/-20 #

生物素hua荣襤uai锹枷∈鸵裹/span>

Biotinytated Detection Ab Diluent

  1 10mL/6mL*

4

浓缩HRPmeijie合物

Concentrated HRP Conjugate

  1 120μL/70μL*

4(bi光)

meijie合物稀释液

HRP Conjugate Diluent

  1 10mL/6mL*

4

浓缩洗涤液(25×

ConcentratedWashBuffer (25×)

  1 30mL/16mL*

4

底物rong液(TMB

Substrate Reagent

  1 10mL/6mL*

4(bi光)

反应终zhi液

Stop Solution

  1 10mL/6mL*

4

封板覆膜

Plate Sealer

  5/3 zhang*

 

荣襤uai锹妓祄ing书

Product  Description

  1 

 

謘hi毂ǜ妩/span>

Certificate of Analysis

  1 

 

tebie说ming
*: [96T/48T](da开bao装后请及时检cha所有物品是否齐quan完整)
#: 
一周内使用ke存于4℃,需chang时间存放或多次使用建yi存于-20.                                      

da鼠钙联蛋白(CNX)mei联**吸附检测试ji盒检测前准备工作:

1. 请提前20分钟从冰xiangzhong取出试ji盒,平衡至shi温。

2. 将浓缩洗涤液用双蒸水稀释(1:25)。未用完的放回4℃。从冰xiangzhong取出的浓缩洗涤液keneng有jie晶,shu于正常xianxiang,ke用40℃水浴微紋ou仁筳ie晶完quanrong解后再配zhi洗涤液(紋ou任露炔灰?0℃,使用时洗涤液应为shi温)。当日使用。

3. 标譲i耳 于10000×g离心1分钟,紋ou氡曜ji?amp;样品稀释液1.0mL至冻干标譲i穤hong,旋紧管盖,jing置10分钟,shang下dian倒数次,dai其chong分rong解后,用移液器将其轻轻hun匀(浓度为10ng/mL)。萮uan蟾菪枰斜侗认∈停ㄗⅲ翰灰獄hi接zai反应孔zhong进行倍比稀释)。建yi配zhi成以下浓度:按照稀释方法图例 标譲i?amp;样品稀释液zhi接作为空白孔0ng/mL。如配zhi5ng/mL标譲i罚喝?.5mL10ng/mL的shang述标譲i芳you牒?.5mL标譲i?amp;样品稀释液的EP管zhong,hun匀即ke,其余浓度襩ai薼ei推。 

4. 生物素hua荣襤uai锹脊ぷ饕海菏笛榍癹isuan当次实验所需用量(以100μL/孔ji),实际配zhi时应多配zhi100-200μL。使用前15分钟,以生物素hua荣襤uai锹枷∈鸵合∈团ㄋ跎锼豩ua荣襤uai锹?1:100)成工作浓度。当日使用。

5. meijie合物工作液:实验前jisuan当次实验所需用量(以100μL/孔ji),实际配zhi时应多配zhi100-200μL。使用前15分钟,以meijie合物稀释液稀释浓缩HRPmeijie合物(1:100)成工作浓度。

当日使用。

da鼠钙联蛋白(CNX)mei联**吸附检测试ji盒标譲i废∈头椒ㄍ祭海ㄒ?00μL/管为例,也ke根据实际用量lai稀释,如200μL/管)

1.使用前将所有的试ji和标benhuan慢jun衡至shi温(18-25oC),试ji不nengzhi接zai37oCrong解。

2.标譲i饵span>(冻干品):每瓶标譲i芳you氡曜ji废∈鸵裹span>1mL,盖好后shi温jing置da约10分钟,同时反复dian倒/搓动以助rong解,其浓度为10ng/mL。准备7个稀释标譲i返命span>EP管,每个EP管zhong紋ou挈span>500μL的标譲i废∈鸵海缤妓鵶hi襩ai伪侗认∈停曜ji废∈鸵裹span>(0pg/mL)zhi接作为空白孔。为保证实验jie果有效性,胟an问笛榍胧褂眯碌谋曜ji穜ong液。

      

1. zaige孔zhong紋ou氡曜ji坊蜓穏e100μL, 37℃孵yu90分钟

2. 紋ou?00μL 生物素hua荣襤uai锹脊ぷ饕海?7℃孵yu60分钟

3. 洗涤3次

4. 紋ou?00μLmeijie合物工作液, 37℃孵yu30分钟

5. 洗涤5次

6. 紋ou?0μL底物rong液, 37℃孵yu15分钟左右

7. 紋ou?0μL终zhi液,立即zai450nm波chang处测量OD值

8. jie果jisuan

一、操作因素对ELISAjie果的影响ELISA操作步zhou复杂,操作瞙uai苯鸾蟙a的误差。以下叙述ge个步zhouzhong的影响因素。

1.加样

2.温yu

3.洗涤

4.显色

5.比色

二、灰区的设置通常情况下,ELISA定性实验以“阳性”和“yin性”lai报告jie果,两者间有一条分界xianbei称为“阳性判秞ian怠保╟ut-off value,CO值),zhe是定性**测定jie果报告的依据。

三、标ben复chaELISA蕑hiぜ觳夤齝heng复杂,影响因素较多,即使shi内质控zai控,也keneng因孔间差异er造成jie果的差异,因此加da复chali度是保证jie果准确性的ke靠方法,比如对HBsAg、HBeAg、HCV-Ab、HIV-Ab、TP-Ab等xiang目的keyi、弱阳性标ben及少见模shi的检测jie果进行复cha。

四、jie果判断和报告常用下列几种方法表shijie果:

1.定性测定

2.半定量测定 jie果襤ua阋缘味缺韘hi。

3.定量测定 即用已知量的标譲i纷饕幌盗邢∈秃蠼蠩LISA测定,绘zhi标准quxian,jie果以优羓i炕虻ei表shi。zaiELISA定量检测zhong每一块反应板都必须绘zhi相应的标准quxian。

da鼠钙联蛋白(CNX)mei联**吸附检测试ji盒会出xian的问题及解决ban法:

1. 紋ou敕从χ誾hi液后,没有吸光值或吸光值偏di。

a.原因:未紋ou雖ei标记物。

解决ban法:请按照操作步zhou进行。

b.原因:试ji盒内容物未nengchong分回。

解决ban法:确定试ji盒内容物回温后再进行操作。

c.原因:shi温taidi。

解决ban法:若shi温taidi(<19℃),请于操作步zhou4,适当延chang温yu时间。

d.原因:未使用试ji盒的清洗液清洗。

解决ban法: 请用试ji盒内所提供的清洗液清洗。

e.原因:试ji盒已过有效期限。

解决ban法:请更huan成仍zai有效期限内的试ji盒。

2. 标准quxianxian性不jia,或是平行性瞙uan谩

a.原因:温yuwei置bi光瞙uan没蚴艿狡鞲扇拧

解决ban法: 请确认温yuwei置既不透光也不透风(如抽屉内)。

b.原因:操作时间拖tai久。

解决ban法:请zai方法熟练后再进行操作。

c.原因:微孔间相hu污染。

解决ban法: 加样品时,请小心勿溅出微孔外,以免造成其它微孔的污染。

d.原因:标譲i坊騧ei标记物所紋ou氲牧坎灰粃hi。

解决ban法:请使用已校正过的移液枪,并确保其与吸头zhi间有高度密合性。

e.原因:添加样品或试ji的操作方法不正确。

解决ban法:加样品或试ji时,吸头请勿接触微孔。

f.原因:洗板过chengfa生问题(如管路dusai、洗完板后未立刻进行下一步zhou)。

解决ban法:请随时jian控洗板机洗板过cheng,洗完后立即进行下一步zhou。

3. 吸光值jun偏高(或xian性不gou陡)。

a.原因:shi温tai高(>25℃)。

解决ban法: 若无法降dishi内温度,请适当缩短步zhou4的温yu时间。

b.原因:底物rong液受到污染。

解决ban法: 若faxian底物rong液已呈xian淡蓝色,请不要再使用。

c.原因:反应时间超过tai久。

解决ban法:请控zhi反应时间。

d.原因:mei标记物污染了盒内其它试ji。

解决ban法:使用过的吸头应立即丢弃,kebi免试ji间相hu污染,fan是试ji(tebie是mei标记物与底物rong液)接触过的容器应立即清洗干净。(先以漂白水浸泡,再以清水冲洗干净,ke确保无残留)

4. yin性标譲i返奈庵礵i于阳性标譲i返奈庵怠

a.原因:微孔zhong的试ji未nengchong分hun合。

解决ban法: 试ji加完后,需轻敲盘四周使其chong分hun合jun匀。

b.原因:洗板过chengfa生问题(同2-f.)。

解决ban法:请参考2-f.

c.原因:添加样品或mei标记物的量不一zhi。

解决ban法: 请参考2-d.

注意shixiang:

A 仔细阅读说ming书。

B 检cha试ji盒标qianshang的有效期。如果超过有效期,请勿使用。

C 按说ming书确定所有试ji齐quan(数量、体ji)。

D 标benzhi备要gui范,每份标ben体ji要按2-3个复孔以shang的量zhi备(zhu存),尽量分装做备份。短期内无法实验者,注意di温保存。

E 准备好所有实验e外所需物品,(比如移液器,试管,清洗器,mei标仪)。

F 按说ming书将所用试ji平衡至shi温,根据检测标ben数量确定所需试ji的量。

G 检cha试ji盒内每种试ji的zhu存条件,保证所有试jijun按照试ji盒内说ming书推荐的条件存储。

H 检cha不wen定或者变质的试jirong液(比如沉淀或变色)。有些试ji,比如标譲i废∈鸵夯蛘呒觳庀∈鸵海琸enengzai设ji蔮en秃谐恋砦铩K惺詊izai祑en雖ei标板zhi前,必需chong分hun匀。er由于沉淀物的te性,zai紋ou雖ei标板zhi前,必需不停搅拌。

I 保证chong分的孵yu时间和温度。

J qie勿使用不同生产批hao的试ji取代xian有试ji或hun合xian有试ji。

K zaihun合或rong解蛋白rong液时,bi免泡沫产生。

L zai实验开shizhi前,癱ai藕檬笛榱鱟heng。

M zai实验开shizhi前,清jie工作台。

N 若有问题,应与我公si或代理shang的技术支持联系

da鼠钙联蛋白(CNX)mei联**吸附检测试ji盒jie果判断:

1. 每个标譲i返腛D值减去空白孔的OD值后作图,如设謒ei纯祝瑉e应取其平jun值jisuan。以标譲i返呐ǘ任嶙辏琌D值为纵坐标,绘出标准quxian。亦ke以OD值为横坐标,标譲i返呐ǘ任葑辏娉霰曜紂uxian。

2. 推荐使用专业的quxianzhi作ruan件,如curve expert 1.3或1.4,zairuan件界面既ke根据样品OD值,由标准quxiancha出相应的浓度,乘以稀释倍数;亦ke将样品的OD值代ru标准quxian的拟合方chengshi,jisuan出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。

3. 若样品OD值高于标准quxianshang限,应适当稀释后zhong测,jisuan浓度时应乘以稀释倍数。

 te异性:

ben试ji盒用于检测da鼠钙联蛋白(CNX),经检测与其它相似物质无ming显jiao叉反应。

由于受到技术及样benlai源的限zhi,不keneng完成对所有相关或相似物质jiao叉反应检测,因此ben试ji盒有keneng与未经检测的其它物质有jiao叉反应。

回收率:

穤hi鹩诙ㄖ笛寮把鵥enzhong紋ou胍欢康膁a鼠钙联蛋白(CNX)(加标样品),zhong复测定并jisuan其jun值,回收率为测定值与理lun值的比率

xian性:

zai定值血清及血浆样ben内紋ou胧柿康膁a鼠钙联蛋白(CNX),并倍比稀释成 1:21:41:81:16 的dai测样ben,xian性范围即为稀释后样benzhongda鼠钙联蛋白(CNX)含量的测定值与理lun值的比率。


da鼠钙联蛋白(CNX)mei联**吸附检测试ji盒jing密度:

jing密度用样苀an舛ㄖ档谋湟煜凳?/span> CV 表shi。CV(%) = SD/mean×100

批内差:取同批次试ji盒对di、zhong、高值定值样ben进行定量检测,每份样ben连续测定 20 次,穤hi餵isuan不同浓度样ben的平jun值及 SD 值。

批间差:选取 3 个不同批次的试ji盒穤hi鸲詃i、zhong、高值定值样ben进行定量测定,每个样ben使用同一试ji盒zhong复

测定 8 次,穤hi餵isuan不同浓度样ben的平jun值及 SD 值。

批内差: CV<10%

批间差: CV<12%

wen定性:

经测定,试ji盒zai有效期内按推荐温度保存,其活性降di率小于 5%

为减小外部因素对试ji盒破huai前后检测值的影响,实验shi的环綾heng跫杈×勘3忠粃hi,you其是实验shi内温度、湿度及温yu条件。其次由同一实验员lai进行操作ke减少人为误差。


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